本发明披露了一种蜜蜂巢内活动观测装置及其使用方法，其中观测装置包括亚克力外壁，所述亚克力外壁组成的蜂箱内设置有麦克风、温湿度探测仪、木质挡板、RFID读写器、热成像摄像头和高清微距摄像头，蜂箱内各装置与主机相连，并连接显示器。本发明通过高清微距摄像头可清晰记录蜜蜂活动情况，热成像摄像头可记录相应蜜蜂的发热情况，两者结合可同步记录蜜蜂行为，并利用无线射频芯片成像，模拟观测对象的活动轨迹，可以观察到蜜蜂在巢房内的活动，有效的全方位观测蜜蜂在蜂巢内真实的生活状态。