一种碱性成纤维细胞生长因子制备方法及其应用
实质审查的生效
摘要
本发明公开了一种碱性成纤维细胞生长因子制备方法，包括以下步骤：融合质粒构建；工程菌构建；将上述工程菌培养于培养基，当大肠杆菌的OD值达到2值，温度调为32℃诱导16小时，收集菌体，破碎，离心取上清；将上清37℃下水浴加热，37℃离心，取沉淀部分；向沉淀部分加入预冷的PBS后负40度冷冻2小时，超声溶解，低温离心取溶解部分；溶解部分加入带自备的His‑Tag的EK酶，冰水中酶切12小时；酶切完成后，蛋白质溶液过Ni‑NTA层析柱，ELP‑IDP标签以及带His‑Tag的EK酶将结合至层析柱上，收集流穿部分。bFGF在促进细胞生长增殖方面应用。本发明所制备bFGF的可溶性得到显著提升；同时大幅度简化纯化步骤，具有良好的经济价值。
基本信息
专利标题 ：
一种碱性成纤维细胞生长因子制备方法及其应用
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN114540392A
申请号 ：
CN202210198933.0
公开（公告）日 ：
2022-05-27
申请日 ：
2022-03-02
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
黄凯宗林艳王帅韦栋平樊宏伟
申请人 ：
南京市第一医院
申请人地址 ：
江苏省南京市长乐路68号
代理机构 ：
南京中擎科智知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人 ：
黄智明
优先权 ：
CN202210198933.0
主分类号 ：
C12N15/70
IPC分类号 ：
C12N15/70 C07K14/50 C07K19/00 C12P21/06 C07K1/22 C07K1/14 C12N5/077 C12R1/19
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N15/00
突变或遗传工程；遗传工程涉及的DNA或RNA，载体或其分离、制备或纯化；所使用的宿主
C12N15/09
DNA重组技术
C12N15/63
使用载体引入外来遗传物质；载体；其宿主的使用；表达的调节
C12N15/70
专门适用于大肠杆菌的载体或表达系统
法律状态
2022-06-14 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 15/70
申请日 : 20220302
申请日 : 20220302
2022-05-27 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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