本发明提供了一种山鸡椒的遗传转化方法和应用，涉及生物技术领域。本发明提供的山鸡椒的遗传转化方法，采用抽真空处理和在侵染液中添加葡萄糖的方式处理山鸡椒无菌苗的愈伤组织，实现山鸡椒的遗传转化，该方法遗传转化效率高(4％)，突破富含次生代谢物的植物组织的易褐化问题，培育周期短，并且遗传转化体系稳定；或者在侵染液侵染转化山鸡椒无菌苗过程中进行抽真空处理，可在48‑60h内获得山鸡椒瞬时转化植株，可用于亚细胞定位、检测目的基因调控精油合成的功能等研究，为山鸡椒的分子育种提供技术支撑。同时，本发明提供的山鸡椒的遗传转化方法可对樟科树种及其他富含次生代谢物的植物的遗传转化体系的建立提供参考。