本发明属于医药技术领域，公开了一种用液相色谱测定维生素K1注射液中氯离子和钠离子的方法，并采用外标法计算维生素K1注射液中钠离子的浓度。所述方法包括以下步骤：配制供试品溶液；配制对照品溶液；进行系统适用性实验；按照高效液相色谱条件进行测定；按外标法，计算氯离子与钠离子的浓度。本发明立足于高效液相色谱分析方法，针对阴离子与阳离子不能同时进行测定的技术难点，采用新的离子交换色谱柱以及流动相，以及采用电喷雾式检测器，解决了阴阳离子不能同时测定的技术问题，本发明同常用的采用离子色谱仪分别测定氯离子和钠离子对比，本方法能够同时测定同一样品中氯离子与钠离子的含量，提高了检测的效率。