本发明属于生物医药领域，具体涉及微血管体外培养方法及培养液。本发明的微血管体外培养方法，具体包括分离、过滤和培养步骤，采用短时循环消化的方法从组织中分离微血管，减少了原代微血管细胞在酶溶液中的处理时间，降低了酶溶液对细胞的伤害，提高细胞活力。本发明还提供了一种微血管体外培养液，使得微血管可以在体外普通培养皿的硬基底表面以管状形式生长，同时保留同一组织来源的周细胞围绕在内皮细胞周围一起生长，更好地模拟体内微血管，并且可以在体外长时间培养。