本发明公开了一种重组腈水解酶的生产及固定化方法及其对乙腈的降解应用，涉及环境生物技术领域，该酶水解酶融合多肽为高温腈水解酶突变后，与纤维素结合域共整合后生成的新型工业酶，可以特异结合到木浆纤维素，实现酶的固定化及高效特异的污染物降解。本发明公布了表达该多肽的重组表达系统，包括重组载体、表达宿主、以及纤维素结合域以及连接肽段的序列，以及用于重组多肽表达的分泌肽序列。枯草芽孢杆菌重组表达的腈水解酶融合蛋白经一步法固定到木浆纤维素，提高酶催化的稳定性，实现对流动污水中乙腈的生物去除。