本发明公开了一种评价茄子对根结线虫抗性的方法，涉及植物根结线虫抗性鉴定技术领域。该方法包括以下步骤：(1)鉴定基质准备；(2)鉴定穴盘准备；(3)播种；(4)苗期管理；(5)间苗与定苗；(6)抗病性鉴定；(7)抗病性评价。本发明将病土与育苗基质按一定比例混合，在苗期管理前期浇灌根结线虫虫卵水，诱发根结线虫病全面发生；同时设置抗病、感病对照，设置3次生物学重复，通过差异显著性分析，评价茄子对根结线虫的抗性。本发明利用田间病土做病源，结合常规育苗技术、差异显著性分析技术，操作简便，鉴定结果准确可靠。本发明不需要专业设备人工分离、收集和培养根结线虫虫卵，且能克服传统病土接种法接种不均匀的情况。