本发明公开了一种截留悬浮细胞共培养的微流控芯片及细胞培养方法，涉及细胞培养技术领域，包括盖板层，所述盖板层的底端设置有密闭层，所述密闭层的底端设置有细胞培养层，所述盖板层的中部固定连接有观察窗，所述盖板层的顶端设置有连接机构，所述观察窗的侧面固定连接有清理机构。本发明通过将连接销插入连接套中，从而能够对芯片进行连接，并通过顶紧弹簧顶动弹性弯板，使得弹性弯板对连接销进行挤压，从而对芯片进行固定，同时连接销的插入会对顶板进行挤压，从而带动卡板进行伸出，并通过紧固弹簧顶动顶块，从卡板的侧面进行伸出，从而使得对芯片的固定效果更好，方便了微流控芯片的使用。