本发明涉及一种刚性多孔交联聚丙烯酰胺微球的制备方法。具体是通过丙烯腈的悬浮聚合制备聚丙烯腈微球，再通过其酸性水解反应来制备聚丙烯酰胺微球。将饱和食盐水、明胶在35－50℃恒温水浴下搅拌至明胶完全溶解；将丙烯腈、二乙烯基苯、偶氮二异丁腈、1，2－二氯乙烷溶解后加入反应容器中，在反应温度50－85℃和搅拌速度60－300rpm条件下反应3－8h后取出产品，用热水抽滤洗涤至无泡沫，即可得到聚丙烯腈微球。将聚丙烯腈微球、二氯乙烷在反应温度30－90℃和搅拌速度60－300rpm条件下溶胀1－2h。然后在冰水浴中滴加70－90wt％浓硫酸，滴加完成后升温至30－90℃，反应2－6h后取出产品。用水洗至中性，即可得到聚丙烯酰胺微球。此聚丙烯酰胺生化吸附剂微球具有吸附效率高以及成本低的优点。