本发明公开一种人MDR1基因表达调节剂筛选系统，还提供了利用该系统筛选人MDR1基因表达调节剂的方法，以期筛选到高效、低毒的化疗增敏剂和耐药性逆转剂，该筛选系统包含一种含有外源多核苷酸的重组载体以及由该重组载体转化或转染的宿主细胞，该重组载体包含原始载体和人MDR1基因启动子，其中所述原始载体含有一个报告基因且不含启动子，所述人MDR1基因启动子连接到报告基因的上游，且人MDR1基因启动子的活性和报告基因的表达具有相关性。本发明还公开了构建该筛选系统的方法及其用途。本发明的筛选系统可用于筛选人MDR1基因表达调节剂。