本发明是一种生物技术领域的长春花毛状根再生植株的方法。本发明将长春花毛状根外植体切段，置于愈伤组织诱导培养基上，经光照培养，形成愈伤组织，通过接种到不定芽诱导培养基上培养，形成芽点，挑选芽点的愈伤组织继续培养，经光照培养，形成不定芽，切取不定芽转移到生根培养基上，产生出不定根，将再生出的完整植株转移到快速繁殖培养基上继续培养，选取株系，移栽到盛有移栽基质的花盆中，通过驯化可获得生长正常的长春花植株。本发明筛选出适合长春花毛状根不定芽分化和生根的培养基，长春花毛状根的不定芽分化率达80％，不定芽生根率为100％，再生植株的移栽成活率为100％。