本发明属中药制药领域，涉及一种从植物红景天中分离高纯度红景天苷的方法。本发明采用热水或含不高于50％的甲醇或乙醇水溶液提取原料；所得提取物经浓缩、乙醇沉淀后，经高分子填料固定相的色谱柱，采用不高于10％的甲醇或乙醇水溶液进行洗脱；分离的产物经含键合相硅胶填料固定相的色谱柱进行分离，得高纯度的红景天苷。本方法制备的产物规模大、收率高、纯度高，所采用的高分子填料固定相和键合相硅胶填料固定相可反复使用，用于洗脱的有机相不含易挥发、毒性大、对环境有严重污染低极性的有机溶剂，有机相回收后，可重复利用。