一种制备巴西蘑菇培养基的方法，其步骤包括：将木屑堆高5至15米进行第一次发酵腐化，发酵时间3个月；每15至30天进行一次周期性翻堆；第一次发酵过的木屑中加入干燥杀菌过的牛粪进行第二次发酵，木屑发酵堆高5至15米，发酵内部温度70至80度；每15至30天进行一次周期性翻堆；发酵木屑色泽成接近黑色的深咖啡色，并且无阿摩尼亚的尿骚味，即可成为栽培巴西蘑菇用的太空包的基础原料。