氯霉素胶体金法检测试纸及制备方法，属于生物学免疫方法检测待测物质的测定试纸及制备方法。氯霉素是饲料和养殖生产禁止使用的抗生素类药品，长期摄入食品动物中残留的氯霉素会导致不可逆的再生障碍性贫血。本发明试纸用胶体金标记的氯霉素单抗2、氯霉素偶联抗原3、抗鼠IgG抗体4固着在硝酸纤维素膜6和底板7上制成，并以氯霉素偶联抗原3为检测带和抗鼠IgG抗体4为参照带。本发明用层析式一步竞争法原理，通过上下带比色，能以1ppb(1ng/ml)的精度、在5－20min内，半定量检测血清或尿液样品中的氯霉素残留量。本发明是一种快速、准确、半定量检测氯霉素残留量的试纸，能满足食品安全、饲料、屠宰企业及政府检测机构检测需求。