本发明公开了一种人自体胶原蛋白活细胞注射剂及其制备方法，由人自体胶原蛋白和所含的真皮成纤维细胞组成。制备方法是将来源于人身自体的真皮成纤维细胞在体外扩增和培养，使之产生胶原蛋白；将胶原蛋白和所含的真皮成纤维细胞取出即得到该注射剂。本发明的优点在于与以往所用的祛除皮肤凹陷性缺陷的注射液相比，在遇有填补体表较大缺损时，将含有成纤维细胞的自体胶原注射剂注入缺陷区，近期效果十分理想；当该批胶原蛋白衰老，被胶原酶和蛋白水解酶等酶类清理破坏掉时，注射剂内包含的成纤维细胞又产生新的胶原蛋白来代替它们，较好的完成了承上启下的作用，起到持续不衰的优异效果，使远期效果也变得十分理想，实现了从异体到自体质的飞跃。