本发明涉及一种用于诊断RA的多联抗原膜片法检测试剂盒，其包括载片和反应槽，载片载在反应槽上；载片的缺口与反应槽的缺口相对应；载片上设有多个人份反应区，与反应槽中的多个凹槽对应，每个凹槽上方都设有缺口；每个反应区都贴有膜条试纸，膜条试纸上印有RA相关抗原与反应质控带；RA相关抗原为RF、抗CCP、抗RA－33抗体、抗Sa抗体、抗P68所对应的抗原或抗原表位多肽中的四种以上抗原或抗原表位多肽，反应质控带指人IgG和人IgM的混合物。本发明的试剂盒克服了单一自身抗体检测灵敏度和特异度不足和数种自身抗体逐一单个检测在操作上的繁琐，提高了RA诊断的准确性和方便性。本发明还公开了上述试剂盒的制作方法。