本发明公开了一种叶酸－淀粉纳米颗粒与其制备方法及作为肿瘤靶向性药物载体的应用。旨在提供一种可生物降解、工艺简单、制造成本低，并能高效靶向恶性肿瘤及肿瘤细胞，大大提高抗肿瘤药物的作用效果的肿瘤靶向性药物载体叶酸－淀粉纳米颗粒及其制备、应用。本发明的肿瘤靶向性药物载体是由阴离子交联淀粉纳米颗粒与叶酸的聚乙二醇衍生物结合而成，能够包合带正电荷的或中性的抗肿瘤药物，对药物有缓慢释放的作用，降低药物的细胞毒性，并通过叶酸－叶酸受体介导靶向进入肿瘤细胞，从而实现药物缓释、肿瘤靶向、提高药物的生物利用率、降低药物毒副作用的功效。