一种适用于小分子和生物大分子分离的逆流色谱分离柱，它包括有至少一个圆盘，每个圆盘的上端面设有至少一条螺线型流通槽，其背面径向设有至少一条直线型通道。在每个圆盘的两侧设有带孔的隔板，圆盘和隔板通过上下两个法兰和及其内外周均匀设置的多个螺栓部件固定在一起，形成一个新型分离柱。在该分离柱的中心贯穿一个空心自转轴，上法兰上设置有齿轮。本实用新型的优点是：1.通过在圆盘上刻槽的方式使流通槽内的液体在流动过程中所受的离心力呈快速增长，可以在较高的流动相流速下实现溶剂体系的高效保留。2.本分离柱可应用于任何型式的逆流色谱分离仪上。3.本分离柱普遍适用于生物大分子和小分子物质的分离。