本发明属于生物医药技术领域，具体公开了一种泛三甲基化抗体及其制备方法。本发明直接用免疫抗原偶联载体蛋白，如牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或牛甲状腺球蛋白作为免疫抗原前提底物，用烷基化试剂(2‑溴乙基)‑三甲基溴化铵通过化学修饰的方法把前提底物中的半胱氨酸进行烷基化修饰模拟成三甲基化修饰赖氨酸(Kc[me3])；再以这个载体蛋白Kc[me3]作为免疫抗原，免疫兔子，得到特异性识别三甲基化蛋白的血清抗体，即泛三甲基化抗体。用该泛三甲基化抗体与多个组蛋白甲基化修饰的多肽进行免疫沉淀实验并进行蛋白质印迹检测，结果显示，得到的血清抗体可以特异识别三甲基化修饰的组蛋白多肽而几乎不识别零甲基化、一甲基化或者二甲基化修饰的组蛋白多肽。