本发明公开了一种利用紧穗野生稻叶片为外植体获得再生植株的方法，包括前处理、诱导培养、增殖培养、分化培养、壮苗培养、生根培养和炼苗移栽步骤。本发明利用紧穗野生稻植株叶片作为外植体，采用清水清洗，用体积百分浓度8%的次氯酸钠处理8~12min，倒掉次氯酸钠，再加入体积百分浓度5%的次氯酸钠处理5~7min，倒掉次氯酸钠，无菌水洗6~7次后，接入愈伤诱导培养基上进行愈伤诱导培养，愈伤增殖，增殖愈伤再接入分化培养基上进行分化培养，分化苗经过生根，炼苗最后移栽大田，在愈伤诱导、愈伤增殖、分化培养以及生根培养过程中运用不同植物激素组合和培养技术条件的变化，成功的利用紧穗野生稻植株叶鞘作为外植体诱导出愈伤组织并获得再生植株。