本发明公开了高密度发酵表达重组轮状病毒ΔVP8*抗原的培养方法，所述方法包括种子活化、接种种子罐、移种发酵罐培养、流加补料培养、诱导表达以及离心收菌、破碎澄清的步骤，该方案可有效提升重组大肠杆菌在高密度培养条件下可溶性重组蛋白的表达量，较普通的培养方案在提升菌体密度的同时，明显提升可溶性蛋白的表达量，且具有无需调控pH，操作方便，可控性强，稳定性好、生产成本低以及可规模放大的特点。