一种重组超广谱β－内酰胺酶的表达纯化及其高密度发酵方法
专利权的终止
摘要
本发明公开了重组超广谱β－内酰胺酶的表达纯化及其高密度发酵方法。涉及含SHV－4型ESBL基因插入分泌型表达载体，并在大肠杆菌中表达。还涉及中试级别的发酵和纯化，发酵获取大量细菌后，菌体悬液超声破碎、离心获取超声上清及其包涵体沉淀：超声上清通过亲和层析，一步就获取高纯度重组SHV－4型ESBL，平均每升发酵液中得到7mg，酶比活为476IU/mg；而包涵体沉淀的复性和纯化同时进行，沉淀溶于尿素后，采用分子筛层析法纯化，获取高纯度重组SHV－4型ESBL，并在纯化的同时使重组ESBL复性，得到每升发酵液中得到17mg SHV－4型ESBL，酶比活为438IU/mg。本发明为各型ESBL生产制备提供一种方法，为大量制备ESBL打下坚实的基础。
基本信息
专利标题 ：
一种重组超广谱β－内酰胺酶的表达纯化及其高密度发酵方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN101003798A
申请号 ：
CN200610006572.6
公开（公告）日 ：
2007-07-25
申请日 ：
2006-01-17
授权号 ：
暂无
授权日 ：
暂无
发明人 ：
吕建新
申请人 ：
温州医学院
申请人地址 ：
325035浙江省温州市茶山高教园区温州医学院
代理机构 ：
代理人 ：
优先权 ：
CN200610006572.6
主分类号 ：
C12N9/80
IPC分类号 ：
C12N9/80 C12N15/55 C12N1/21 C12R1/19
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N9/00
酶，如连接酶；酶原；其组合物；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法
C12N9/14
水解酶
C12N9/78
作用在除肽键外的碳-氮键上
C12N9/80
作用在有线型酰胺中的酰胺键上
法律状态
2015-03-18 ：
专利权的终止
未缴年费专利权终止号牌文件类型代码 : 1605
号牌文件序号 : 101601599483
IPC(主分类) : C12N 9/80
专利号 : ZL2006100065726
申请日 : 20060117
授权公告日 : 20100512
终止日期 : 20140117
号牌文件序号 : 101601599483
IPC(主分类) : C12N 9/80
专利号 : ZL2006100065726
申请日 : 20060117
授权公告日 : 20100512
终止日期 : 20140117
2010-05-12 ：
授权
2009-01-07 ：
实质审查的生效
2007-07-25 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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