本发明提供一种马来酸匹杉琼有关物质的高效液相色谱分析检测方法，包括如下步骤：a.取马来酸匹杉琼供试品，用混合溶剂或者流动相配制供试品溶液；b.取供试品溶液，加混合溶剂或流动相稀释，作为自身对照溶液；c.取自身对照溶液及供试品溶液，用流动相冲洗，检测并记录色谱图；d.根据步骤c获得的自身对照溶液及供试品溶液色谱图，计算出杂质含量；e.再取自身对照溶液及供试品溶液，用流动相冲洗，检测并记录色谱图；f.根据步骤e获得的色谱图计算出杂质含量。本发明采用两种不同的流动相体系对马来酸匹杉琼供试品溶液进行洗脱，使匹杉琼主峰与杂质峰、杂质峰与杂质峰之间的分离度达到2.0以上，从而准确地检测出马来酸匹杉琼样品中有关物质的含量，为马来酸匹杉琼原料药与其制剂的质量控制提供了一套操作简单、方便快捷的有关物质检测方法。