一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法
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摘要
本发明公开了一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果，通过定点突变技术将腾冲嗜热厌氧菌中丙氨酸消旋酶的173、360两个位点分别突变，构建双点突变表达载体pET‑S173Q/Q360Y，通过原核表达、纯化获得酶蛋白。所获得的突变体蛋白对底物L‑Ala的表观二级速率常数kcat/Km为18.44 s‑1·mM‑1，平衡常数Keq(L/D)为3.95，是野生型蛋白的68.30和3.69倍，且突变体蛋白的半衰期也有一定程度的提升。由于突变体蛋白可以提高反应产物D‑Ala的转化效率，因此，本突变体可以作为生物合成D‑Ala的元器件，有较好的应用价值。
基本信息
专利标题 ：
一种丙氨酸消旋酶的突变体酶蛋白及其制备方法
专利标题（英）：
暂无
公开（公告）号 ：
CN110669751A
申请号 ：
CN201910691113.3
公开（公告）日 ：
2020-01-10
申请日 ：
2019-07-29
授权号 ：
CN110669751B
授权日 ：
2022-06-14
发明人 ：
鞠建松韩卿卿徐书景任晓朴窦金萍郭博涵何广正赵宝华
申请人 ：
河北师范大学
申请人地址 ：
河北省石家庄市南二环东路20号
代理机构 ：
石家庄新世纪专利商标事务所有限公司
代理人 ：
董金国
优先权 ：
CN201910691113.3
主分类号 ：
C12N9/90
IPC分类号 ：
C12N9/90 C12N15/60 C12N15/70 C12P13/06 C12R1/19
IPC结构图谱
C
C部——化学；冶金
C12
生物化学；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物学；酶学；突变或遗传工程
C12N
微生物或酶；其组合物；繁殖、保藏或维持微生物；变异或遗传工程；培养基。
C12N9/00
酶，如连接酶；酶原；其组合物；制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法
C12N9/90
异构酶
法律状态
2022-06-14 ：
授权
2020-02-11 ：
实质审查的生效
IPC(主分类) : C12N 9/90
申请日 : 20190729
申请日 : 20190729
2020-01-10 ：
公开
注：本法律状态信息仅供参考，即时准确的法律状态信息须到国家知识产权局办理专利登记簿副本。
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