本发明涉及EOL自动化测试的技术领域，具体涉及一种应用于EOL自动化下线测试的通信协议报文结构及其应用。通信协议报文结构包括控制请求帧结构和反馈报文帧结构；控制请求帧结构包括沿行方向分布测试条目字节栏、子功能码/数据标定字节栏和多个状态控制/数据标定报文字节栏，反馈报文帧结构包括反馈功能字节栏和功能测试结果字节栏，反馈功能字节栏为与控制报文一一对应的反馈功能信息，功能测试结果字节栏为反馈的功能测试结果数据。能够通用于不同零部件测试的报文反馈，且不同功能种类、同一功能种类中不同子功能的控制请求及反馈报文均能明确区分，无需单独制定测试需求，降低了报文交互复杂度，缩短产品开发调试周期，提高效率。