本实用新型公开了一种生物样品膜上的自发光物体的成像装置，所述成像装置包括壳体、光电转换元件和图像校正设备；壳体内部构成暗室空间；光电转换元件设于壳体内；光电转换元件用于在未放入生物样品膜时，获取壳体内部的第一暗场图像；在将生物样品膜贴附在光电转换元件表面后，光电转换元件还用于获取壳体内部的第二暗场图像；图像校正设备用于根据第一暗场图像对第二暗场图像进行校正处理，获取自发光物体对应的目标图像。本实用新型能够有效地、更准确地获取清晰度较高的自发光物体的目标图像，操作过程简单、成像耗时较短，且该成像装置具有结构小、制造成本低、操作便捷且方便携带等优点。