本实用新型公开了一种分光显微光路结构，包括第一物镜、第二物镜、反光镜、分光镜和光路成像系统，光路成像系统位于第一物镜上方，分光镜位于第一物镜和光路成像系统之间，反光镜位于分光镜一侧，第二物镜位于反光镜下方，第一物镜的光线经过分光镜透射传输至光路成像系统，第二物镜的光线经过反光镜反射至分光镜，再由分光镜反射至光路成像系统。通过反光镜+分光镜的方式实现在不移动物镜的前提下进行不同倍率物镜的切换，省略了物镜切换机构，节约了空间和成本，提高了可扩展性；同时结构简单，避免了物镜切换机构在长期的反复切换过程中造成的磨损；并且物镜可以直接安装在Z轴驱动模组上进行对焦，降低了Z轴驱动模组的载荷。