本实用新型公开了一种双孔检测卡及试剂盒，其中双孔检测卡包括上壳、下壳和设置在上壳与下壳之间的试纸条，所述上壳包括样本稀释加液孔、样本加液孔和观察窗，所述样本加液孔形成在样本稀释加液孔与观察窗之间；所述样本加液孔的内侧壁表面光滑，内侧壁表面与上壳的水平面呈80°‑90°夹角设置。实施本实用新型，通过样本稀释加液孔和样本加液孔的双孔设置结合样本加液孔的结构设计使得可以用更少的样本量达到更高的检测灵敏度，由于样本量减少，还降低了样本中其它物质的干扰，同时也改善了检测精密性和准确度，适用于定量诊断的质量标准，为床旁检测（POCT)提供了可实现的基础。