本实用新型公开了一种分离耐头孢类抗生素蜡样芽胞杆菌的组合试剂盒，由平皿、培养基，包装瓶及试纸片组成，平皿为无菌塑料透明平皿，直径为90mm；培养基为蜡样芽孢显色培养基；所述包装瓶为棕色玻璃瓶，所述试纸片为圆形含有头孢硝噻吩的滤纸。将待测试菌株或含测试菌株的样品液通过划线或涂布于具有培养基的平板上，36℃±1℃培养18h～24h，挑取目标菌落再涂抹于试纸片上，通过观察试纸片颜色变化即分离获得耐头孢类抗生素的蜡样芽胞杆菌。本实用新型分离耐头孢类抗生素蜡样芽胞杆菌的组合试剂盒，可在分离蜡样芽胞杆菌的同时得到鉴别，配备的β‑内酰胺酶试纸片即时获得分离出的蜡样芽胞杆菌是否对头孢类抗生素具有耐药性，从而缩短了检测周期，提高了工作效率。