本实用新型公开了一种微流控阻抗式生物在线检测装置，属于微流控生物检测技术领域，一种微流控阻抗式生物在线检测装置，包括主机、阻抗分析仪、多路转换器和检测主体，主机和阻抗分析仪连接，阻抗分析仪和多路转换器连接，多路转换器和检测主体连接，检测主体包括从上往下依次分布的微流控芯片、收集板和防溢板，微流控芯片的上端固定连接有引入管和引出管，引入管和引出管的内部均固定连接有单向阀，本实用新型通过收集板和防溢板的设置，不仅减少了样品引入时的溢出情况，还方便对溢出以及引出的样品试剂进行收集，减轻了样品引出难度，提高了样品引出效率，减小了样品对微流控芯片表面的污染，提高了样品检测效率。