本发明公开了一种丝素蛋白‑透明质酸钠交联双网络凝胶及其制备方法。利用蚕丝丝素蛋白中酪氨酸残基含量较高的特点，用酪氨酸酶催化丝素蛋白大分子间发生交联反应,生成丝素蛋白第一网络；用碳化二亚胺介导透明质酸钠大分子间的交联，生成透明质酸钠第二网络；将第一网络和第二网络混合后，依靠碳化二亚胺的介导，生成第一网络与第二网络之间的交联键，从而制成丝素蛋白‑透明质酸钠交联双网络凝胶。本发明提供的凝胶具有三维网络结构稳定，不易崩塌和解体，抗生物降解能力强，生物相容性好的特点，可广泛用于组织填充、引导组织再生、组织工程支架及药物载体等。