本发明属化学制药技术领域，涉及一种二氟取代的罗米地辛类似物、其制备方法和其作为抗肿瘤剂的用途，本发明中，将化合物1与光学纯的叔丁基亚磺酰胺反应得化合物2，将有机锌试剂与化合物2发生化学反应生成化合物3；发生酯水解制得化合物4；将化合物4与中间体反应得化合物5；化合物5发生脱保护基反应得含游离氨基的化合物6；化合物6发生酯水解得含游离羧基的化合物7；化合物7与中间体发生分子内缩合反应制得化合物8；化合物8发生脱保护基反应及分子内二硫键的生成，制得化合物9。本发明所述的化合物具有强的抑制多种肿瘤细胞的作用，尤其是能抑制胃癌、膀胱癌、结肠癌、肝癌、淋巴癌或乳腺癌的细胞增殖，因而具有潜在的抗瘤用途。