本发明公开了一种核酸探针组合物，包括：检测探针、质控探针、报告探针、第一核酸探针、第二核酸探针、信号放大探针；第一核酸探针包括第一序列区和第二序列区，第一序列区与待检测核酸的标记辅助序列区互补配对；第二核酸探针包括第三序列区和第四序列区，第三序列区与待检测核酸的捕获辅助序列区互补配对，第四序列区与检测探针互补配对；报告探针与质控探针互补配对；信号放大探针包括依次连接的放大链前置引导序列区和多个依次连接的放大序列区，放大序列区与报告探针互补配对，放大链前置引导序列区与第一核酸探针的第二序列区互补配对。本发明还公开了一种核酸检测方法及试剂盒。