本发明适用于细菌检测技术领域，提供了一种同时检测嗜低温弓形杆菌及斯氏弓形杆菌的引物探针组件、试剂盒及其应用，公开了同时检测嗜低温弓形杆菌及斯氏弓形杆菌的检测引物组和检测探针组的核苷酸序列，共2套，包含所述检测引物组和检测探针组的试剂盒。本发明检测结果准确可靠，特异性强，灵敏度高，检测低限为10²CFU/mL，且无需对目的基因扩增产物进行电泳检测，操作简单，检测周期短，减少了操作人员的工作量，简化了弓形杆菌检测流程，可作为敏感的初筛手段，提高弓形杆菌培养检测的阳性率，为我国今后制定食品中弓形杆菌卫生学标准提供有力的技术支撑。