本发明公开了一种基于双色量子点比率荧光探针的C反应蛋白高灵敏免疫检测方法，它将银纳米颗粒AgNPs偶联CRP标记抗体，再与捕获抗体对C反应蛋白进行双抗体夹心，获得双抗体夹心模型；进一步利用氰离子CN^‑溶解双抗体夹心模型捕获的AgNPs，使得AgNPs释放出Ag⁺进行信号放大，然后加入所述双色量子点比率荧光探针，进行测量荧光光谱，即可实现C反应蛋白的定量分析；双色量子点比率荧光探针是以红色量子点为核心，并包埋于巯基化树状二氧化硅球中，且外层组装有绿色量子点，形成的双色荧光微球。本发明的方法利用CN^‑腐蚀AgNPs，使其变为Ag⁺，基于银离子与量子点比率荧光探针之间的离子交换作用，通过荧光信号和溶液颜色的变化，从而定性和定量的检测C反应蛋白的浓度。