本发明公开了一种检测2,6‑吡啶二羧酸钙浓度的荧光探针及制备方法和应用。所述荧光探针为稀土‑强力霉素配合物，具体方法是：将可溶性稀土盐和强力霉素溶于水，得到均一的含稀土元素的溶液；调节含稀土元素的溶液的pH为弱碱性，此时出现沉淀物，再继续反应至沉淀物不再增加，得到稀土‑强力霉素配合物荧光探针。应用是将该荧光探针用于检测2,6‑吡啶二羧酸钙溶液的浓度。本发明创新地将强力霉素与稀土离子配位，得到的稀土‑强力霉素配合物具有荧光寿命长、发光信号稳定、Storkes位移大、窄峰及避免生物体的背景干扰，与2,6‑吡啶二羧酸钙的结合性较强，能够用于2,6‑吡啶二羧酸钙浓度的检测，并且可推广至其他传感器，用于对不同生物小分子的浓度检测。