本实用新型公开了一种检测荧光发光的光路结构，包括光源、第一聚光镜以及分光镜并按输出光路方向从右至左依次设置，所述分光镜上方沿其透射光路方向从下至上依次设有透镜、第二聚光镜和光电倍增管，所述分光镜下方沿其反射光路方向从上至下依次设有第三聚光镜、样品微孔和检测样品，所述样品微孔出光口正对所述检测样品设置，所述光源与第一聚光镜之间以及透镜与第二聚光镜之间均设有滤光组件，该检测光路结构简单、稳定性好，而且能够对时间分辨荧光免疫分析法、荧光分析法和化学发光免疫分析法进行多模式测量，提高同一光路结构测量的适用范围。