本发明涉及蛋白领域，具体涉及具有氨基酸结构ESLKGVDPKFLR的生物活性肽及其制备方法和应用，具有氨基酸结构ESLKGVDPKFLR的生物活性肽选自生物活性肽ESLKGVDPKFLR、生物活性肽QRYESLKGVDPKFLR、生物活性肽RYESLKGVDPKFLR或生物活性肽YESLKGVDPKFLR中的一种或几种。经过体外免疫功能调节实验，验证了具有氨基酸结构ESLKGVDPKFLR的生物活性肽具有较好的免疫调节功能。本发明具有氨基酸结构ESLKGVDPKFLR的生物活性肽能显著促进体外巨噬细胞吞噬中性红能力，对炎症动物有很好的保护作用，并促进巨噬细胞活化并释放细胞因子，提高其在正常巨噬细胞静息状态下的作用，从而调节机体的免疫力，提高生命的质量，对开发具有免疫调节功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。