本发明涉及蛋白领域，具体涉及具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽及其制备方法和应用，具有氨基酸结构LTVINQTQKENLR的生物活性肽选自生物活性肽LTVINQTQKENLR、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKF、生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFYK或生物活性肽VLTVINQTQKENLRKFY中的一种或几种。经过体外免疫功能调节实验，验证了生物活性肽LTVINQTQKENLR、VLTVINQTQKENLRKF、VLTVINQTQKENLRKFYK和VLTVINQTQKENLRKFY具有较好的免疫调节功能。本发明的LTVINQTQKENLR、VLTVINQTQKENLRKF、VLTVINQTQKENLRKFYK和VLTVINQTQKENLRKFY可促进巨噬细胞吞噬中性红能力，具有一定的免疫调节作用，促进淋巴细胞增殖，降低机体发病率，提高生命的质量，对开发具有免疫调节功能的食品、保健品和药物具有十分重要的意义。