本发明涉及一种成年鼠耳蜗体培养体系的建立方法及其应用。本发明是将成年鼠的带有骨性支架的内耳感觉上皮和螺旋神经节神经元的共培养结构置于培养液中进行培养，定期更换培养液；培养液的组分包括N2、B27和青霉素。本发明建立了首个成年哺乳动物耳蜗感觉上皮和螺旋神经节神经元的一体化培养体系，能长时程的维持内耳感觉上皮结构的完整以及支持细胞和螺旋神经节神经元的存活，为研究成年哺乳动物内耳支持细胞增殖与转分化、毛细胞分化与成熟、新生毛细胞与螺旋神经节神经元突触连接的建立等提供了研究模型，填补了领域内的模型的空白，研究水平达到国际领先。