本发明公开了一种1,8‑萘酰亚胺类硫化氢荧光分子探针的制备方法及其在硫化氢识别和检测中的应用。本发明的探针以N‑(对苯甲基)‑4‑羟基‑1,8‑萘酰亚胺为荧光母体，2,4‑二硝基苯醚为识别基团，得到具有双识别位点的荧光分子探针，硫化氢通过硫解2,4‑二硝基苯醚使荧光团暴露出羟基，从而实现荧光强度的增强(超过30倍)。本发明所述荧光分子探针具有光化学性质稳定、荧光量子产率高及价格经济便宜等优点，特异性识别硫化氢，不受Na⁺、Ca²⁺、NO₂^‑、H₂O₂、ClO^‑、HSO₄^‑、CN₂H₄S、HSO₃^‑、S₂O₅^2‑、S₂O₈^2‑等离子的干扰，线性检测范围增加至0‑40μmmol/L，可用于河水、雨水、饮用水、钻井液、沼泽液等高浓度硫化氢的定量检测，具有潜在的实际应用价值。