本发明公开了一种浓度梯度与细菌检测一体化的微流控芯片及其设计方法。其包括浓度梯度分级模块和菌液输送检测模块。所述的浓度梯度分级模块包括依次排列n级混合流道组，n为自然数。混合流道内均设置有多块挡板。各挡板沿着混合流道的长度方向在混合流道两侧壁上交替排列。本发明将传统圣诞树结构浓度梯度芯片的蛇形流道修改为带有交错设置的挡板的直线型流道，可在流道宽度和高度不变的情况下减小流道所占用的面积，并降低加工难度，从而减小微流控芯片的尺寸，并降低加工成本。此外，本发明将浓度梯度药物生成和细菌检测于一体化，可以更加方便快捷的研究多浓度药物对细菌的影响。