本发明公开了一种用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂及其制备方法和试剂条，阻断剂包括有阻断剂缓冲液，阻断剂缓冲液中稀释有鼠单克隆抗体IgG‑1、鼠单克隆抗体IgG‑2、羊抗人IgM/RF多克隆抗体和兔多抗IgG；在所述阻断剂缓冲液还添加有BSA；其中，所述阻断剂缓冲液为三羟甲基氨基甲烷‑盐酸Tris‑HCl缓冲液或磷酸盐PBS缓冲液。阻断剂能有效减少或者排除内源干扰物质对荧光免疫层析检测的不良影响，预防假阳性和假阴性检测结果的出现；将几种不同的鼠单克隆抗体、羊多抗、兔多抗混合后，用于免疫层析检测，能够有效预防、控制样本中内源干扰物质对免疫层析检测的影响，提高免疫层析定量检测试剂检测结果的准确性。