本发明公开了一种实时自校准高功率激光与成像闭环光路系统及方法，该系统包括：图像处理电路板、第一反射镜、第二反射镜、光学装置、激光光学系统、成像光学系统、棱镜、第一相机、第二相机和滤光片；所述图像处理电路板分别与所述激光光学系统、成像光学系统、第一相机和第二相机控制连接；所述激光光学系统发射激光到第一反射镜；所述第一反射镜将所述激光反射到第二反射镜和光学装置；所述激光通过所述第二反射镜反射到观察目标；所述激光通过所述光学装置输入到所述成像光学系统，利用所述棱镜和所述滤光片分别在所述第一相机和所述第二相机成像。本发明有助于实现闭环控制光轴实时自校准调节，消除因环境变化等因素带来的影响。