本发明提供一种小鼠尾静脉自动注射用药装置及其操作方法，主要解决现有技术中小鼠尾静脉注射效率低、失误率高、无法解决自动用药的问题，该装置实现小鼠尾静脉自动注射用药、自动标记，提高实验准确性和效率。该装置包括底板和设置在底板上的固定单元、鼠尾位置调节单元、光学定位单元、注射单元、数据处理单元；固定单元用于实现小鼠的固定，鼠尾位置调节单元用于实现鼠尾的夹紧和鼠尾的位置调节；注射单元位于鼠尾位置调节单元的后端，用于实现药物注射；数据处理单元用于实现鼠尾位置调节单元、光学定位单元、注射单元的控制，经过以上5个单元的协同工作，完成一次小鼠的尾静脉注射用药及数据记录。