本发明提出了一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，包括如下重量份的组分：20‑40份耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液和8‑12份辅料，其中，辅料为水、培养基、甘油中的至少一种，耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液是由耐硼赖氨酸芽孢杆菌经过二次发酵培养所得。本发明的用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，可有效抑制无乳链球菌的生长，发酵液在36h抑制率可达49.5％以上，可用于预防或治疗无乳链球菌引起感染疾病的应用中，尤其是可有效地预防或治疗无乳链球菌感染的罗非鱼链球菌病。耐硼赖氨酸芽孢杆菌不仅可以很大程度上降低无乳链球菌的感染，而且对生态环境没有影响，有望作为合成生物学研究的优质底盘微生物，为无乳链球菌的防治带来新的方向。