本发明公开了一种体外神经发育毒性替代模型包括体外神经细胞的选择、外源性物质的选择、试剂选择、体外神经细胞体外培养、受试物细胞毒性的检测、受试物抑制体外神经细胞分化为神经细胞能力检测、RT‑PCR法检测分化特异基因、受试物发育毒性的分析。建立体外神经发育毒性替代模型的细胞来源根据其复杂程度可用永生化细胞系，原代神经细胞及神经干细胞等。可观察的终点主要有细胞形态学、生物化学标记以及某些分子事件，如基因表达、细胞内信号转导等。随着生物技术的发展，有些终点可能成为高通量筛选的靶点。模型细胞大多来源于啮齿类动物，或来源于人胚胎干细胞以及脊髓源干细胞，这可以减少物种间实验结果外推所带来的不确定性。