本发明公开了一种HepaRG和HepG2构建的体外肝毒性替代模型及其构建方法，本模型是以将两种人肝细胞在常规条件下培养、分化所得。经过分化后，HepaRG细胞对于化合物的代谢能力提高，敏感度增加。建立的模型可用于多种肝毒性化合物的检测，还可用于对已知肝毒性药物的毒性机制进行探索。经过体外验证后，显示本发明筛选出的肝毒性标志物适用食品污染物的肝毒性评测，其表达量可用于肝毒性等级划分。本发明HepaRG和HepG2构建的体外肝毒性替代模型能在肝毒性药物的安全性评测中进行应用。本发明与传统肝功能指标相比测定结果更加稳定，并经过了动物实验的验证，弥补了以往对于食品污染物肝毒性体外研究的空白。