本发明公开一种可穿戴式水凝胶葡萄糖传感器的制备方法，属于生物医学传感技术领域。本发明采用聚丙烯酰胺水凝胶为基础材料，通过加入能够识别葡萄糖分子的苯硼酸基团，制备成水凝胶薄膜，并通过飞秒激光器直写的方式对水凝胶薄膜进行光栅刻写，即得到可穿戴式水凝胶葡萄糖传感器。水凝胶薄膜与葡萄糖结合，呈现线性膨胀，使得光栅周期和有效折射率发生变化。通过检测衍射光谱带的空间位置和衍射光强变化实现对葡萄糖的定量测量。本发明制备的可穿戴式水凝胶葡萄糖传感器应用时放置在眼睛上，透明的水凝胶薄膜在不影响患者的视力的同时可无创监测泪液葡萄糖浓度，从而有效的反应体内葡萄糖含量。