本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种DNA依赖激酶(DNA‑PK)抑制剂能够激活细胞质DNA核酸免疫信号通路cGAS‑STING和细胞质RNA核酸免疫信号通路RIG‑I‑MAVS，通过细胞质核酸免疫通路进行抗病毒治疗和肿瘤免疫治疗中的应用。DNA依赖激酶抑制剂在制备调节激活核酸免疫信号通路，诱导IFN和/或ISGs转录和表达，激活机体适应性免疫反应下的抗肿瘤毒性T细胞和树突状抗原呈递细胞，肿瘤免疫治疗和/或预防肿瘤疾病药物中的应用。DNA依赖激酶抑制剂对抗DNA病毒免疫通路cGAS‑STING和抗RNA病毒免疫通路RIG‑I‑MAVS有激活作用，通过促进干扰素产生达到治疗和预防DNA和RNA病毒的目的。